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同一批次虾苗、不同样本,为何会出现两个不同检测结果?

2017-03-30 09:48:36 作者:江苏省海洋研究所 万夕和教授  | 评论:0 | 来自:农财宝典水产版
选对了虾苗,养虾就相当于成功了一半。随着人们对虾苗认识的深入,虾苗检测也逐渐成为养殖户选购虾苗的重要参考。虾苗病原的检测已经成为企...

选对了虾苗,养虾就相当于成功了一半。随着人们对虾苗认识的深入,虾苗检测也逐渐成为养殖户选购虾苗的重要参考。虾苗病原的检测已经成为企业自检、行业监管的一个重要手段。最近,有江苏如东苗场、养殖户提出疑问,一个批次不同的样本为什么会有阴、阳两种结果?一个池号的两个样本为什会有阴、阳两种检测结果?是不是检测不准确了呢?
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检测的目的就是想知道是这个池里的虾苗带不带病原(以肝肠胞虫为例),也就是说这个池中的苗是阳性还是阴性。在想知道这个结果前,我们应该先掌握一点相关知识。

同一池苗两次抽样出现不同的检测结果,一种原因就是样品的问题,第二可能是检测工作质量的问题。

| 关于样品的问题 |

对于同一苗池,虾苗带虫的情况有这样几种:一是池中每一只苗都是阴性,即0%阳性;二是每一只苗都是阳性,即100%阳性;三是同一池中有的苗为阳性,有的苗为阴性,也就是说阳性率在0-100%之间。从研究的情况来看,较多的池苗属于第三种情况,也就是说并不只是全池苗都是阴性或都是阳性,有时同一池中有阳性和阴性苗共存。这主要是因为同一池的苗并不是来源于一只亲虾,或者同一池中的不同个体存在免疫力差异的原因。对于第三种情况来说,我们很难测出具体该池中阳性苗的百分率。

检测有两种,一种是全检,如我们买的汽车,出厂时是每辆都检测,这在实际工作中可以做到;第二种是抽样,象粮食、虾苗等,实际工作中无法做到每一个体检测。由于是抽取一定的样品来代替整池苗的情况,所以检测的结果就有可能存在偏差。如果检测要获得100%可信度,那就需将池中每一只苗都拿出来检测,这显然不可能做到。抽检只能从池中抽取极少一部分样品来代表。

关于抽样样品的代表性问题,同一个池中上百万的苗只抽了几百只,检测时也只检测其中的更少数个体,要想保证检测结果一致很难做到。试想一下,假设同一池中虾苗携带肝肠胞虫的实际比例(阳性率)是2%,一次从池中随机抽取200只苗,很难保证每一次都能抽样并检测到带虫的个体。因此,两次抽样检测出现不同结果就不难理解了。

为了使检测结果代表整池的可信度相对高,国家在动物疫病检测样品的抽取方面有技术标准可以参考,按照相关标准来抽样检测,依据统计学原理,可以获得较高可信度的检出结果来代表整体(全池),目前我们就是按照这样的标准来实施的,也是按照这样的方法来报告结果的,只不过用检测的结果来代表全池的情况的可信度达不到100%(只有每一只苗都检测的结果才达到100%)。

多数养殖户理解结果为阴性就代表该池中一定没有带虫苗,阳性就代表该池中所有苗都带虫。这是常规的思维方式,但是在水产苗种的抽样检测中需要调整思维。按照相关技术标准,只要出现过一次阳性,检测结果就应报阳性,但这并不代表池中每一只苗都是阳性,只是该池中有带虫苗。所以,如果你看到的结果是阳性,那一种可能是全池苗都是阳性,第二种是只有部分或者少部分苗是阳性,至少说该池中存在阳性的苗。如果检测结果是阴性,只是检测的样品虾苗不带虫,不代表这个池其他虾苗一定没有虫。但是,因为是随机抽样,一次抽取的样品没有抽到阳性苗,说明该池中虾苗的阳性率不高或者就是全阴性。

| 关于检测工作质量的问题 |

影响检测结果的因素比较多,检测人员、检测方法、检测仪器、检测环境、检测试剂都会影响检测结果。只有检测方法一致了检测结果才可放在一起比较,所以检测一定要采用标准方法实施,检测工作要经过认证,检测过程中所有的仪器要经过校准。除了检测具体方法外,检测样品的数量也是影响结果的重要影响因素,可能一次一个样品和一次一百个样品的样品结果可能有不同。所以,国家规定对于从事检测工作并向社会出具具有证明作数据、结果的机构必须进行资质认定,并不是所有具有分析能力的实验室都能获得检验检测资质。

检测仪器对检测的结果影响较大,包括PCR仪在内的肝肠胞虫检测过程中用到的所有计量仪器必须经过法定部门的校准,才能确保检测结果的准确。如果不知道检验机构的仪器是不是经过校准,怎么能相信检测结果呢?就像买了称回来就拿来做公平称,称都没有校准,能公平吗?因此需要关注检测的样品数量、检测方法、检测环境是不是规范等。如果实验室没有经过资质认定,检测环境就有可能被污染,检测假阳性的情况是经常出现的。

谈检测结果的准确度,不是单看一台普通PCR仪器,而是整个方法的准确性,这包括了检测仪器是否校准、样品的前处理方法和时间、样品的数量、检测采用的引物、PCR扩增的时间和循环次数、检测流程等等。只有这些内容确认了,才能确保检测结果的公正、客观、科学。

检测报告是检测行为的终产品,报告的形式是有规定的,因为检测结果与检测人员、检测方法、检测环境、使用的仪器等相关,检测结果出具时应同时注明以上信息,并有专门人员复核和签发,这样的结果才可以采纳。缺乏以上信息的孤立结果应谨慎参考。(就像说上班用了多长时间,这与是骑车、步行还是开车的,是下雨天还是风天,路程多远等因素有关,如果只告诉我们用了1个小时,而没有告诉我们其他信息,那这个1个小时的数据就没有意义了。)

因此,同一批次虾苗的不同样本,出现两个不同检测结果是可能的。如果是因为检测工作质量的问题,那检测结果就不可信。如果是样品本身代表性的问题,那我们应该去科学认识。广大养殖户在采购苗种的时候一定注意查看检测报告,真正理解检测的结果,科学利用检测结果。

检测的意义是让养殖户了解这里面是不是有阳性苗,如果报告为阳性,表明该池中检测到了肝肠胞虫,无论是全池苗带虫还是部分苗带虫,都是养殖户不欢迎的虾苗。养殖户参考检测结果去采购虾苗可以较大程度上降低养殖风险。检测结果为阴性,在规范抽样和检测的样品数量下,其中阳性虾苗数量相对较低或者没有,风险也比没有检测过的苗要小很多。

新渔网(www.efishery.cn)独家报道
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责任编辑:快鱼
标签:虾苗检测
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